食品、添加物等の規格基準の一部を改正する件（平成１８年厚生労働省告示第６４３号）が本日公布され、その内容については本日付け食安発第１１２９００１号当職通知をもって通知したところである。
　これに関連して、「食品に残留する農薬、飼料添加物又は動物用医薬品の成分である物質の試験法について」（平成１７年１月２４日付け食安発第０１２４００１号当職通知。以下「試験法通知」という。）の別添の一部を下記のとおり改正することとしたので、関係者への周知方よろしくお願いする。
　なお、改正後の試験法を実施するに際しては、試験法通知別添の第１章総則部分を参考とされたい。

記

１．目次を別添１のとおり改める。なお、改正部分を下線で示す。

２．第１章総則の別紙を別添２のとおり改める。なお、改正部分を下線で示す。

３．第２章一斉試験法について「LC/MSによる農薬等の一斉試験法Ⅱ（農産物）」を別添３のとおり改める。なお、改正部分を下線で示す。

４．第３章個別試験法について、「シアゾファミド試験法」を別添４のとおり改めるとともに、別添５の「オキシテトラサイクリン試験法（農産物）」、「ジヒドロストレプトマイシン及びストレプトマイシン試験法（農産物）」、及び「メトコナゾール試験法」を加える。

別添４

シアゾファミド試験法（農産物）

１．分析対象化合物
　シアゾファミド

２．装置
　紫外分光光度型検出器付き高速液体クロマトグラフ（HPLC-UV）
　液体クロマトグラフ・質量分析計（LC/MS）

３．試薬、試液
　次に示すもの以外は、総則の２に示すものを用いる。
　シアゾファミド標準品　本品はシアゾファミド99％以上を含み、融点は152～153℃である。

４．試験溶液の調製
１）抽出
　穀類及び豆類の場合は、試料10.0ｇに水20 mLを加え、２時間放置する。種実類及び茶の場合は、試料5.00ｇに水20 mLを加え、２時間放置する。果実及び野菜の場合は、試料20.0ｇを量り採る。その他のハーブの場合は、試料5.00ｇを量り採る。
これにアセトニトリル100 mLを加え、ホモジナイズした後、吸引ろ過する。ろ紙上の残留物に、アセトニトリル50 mLを加えてホモジナイズし、上記と同様にろ過する。得られたろ液を合わせて、40℃以下で約30 mLまで濃縮する。これに10％塩化ナトリウム溶液100 mLを加え、ｎ－ヘキサン100 mL及び50 mLで２回振とう抽出する。抽出液に無水硫酸ナトリウムを加えて脱水し、無水硫酸ナトリウムをろ別した後、ろ液を40℃以下で濃縮し、溶媒を除去する。この残留物にｎ－ヘキサン５mLを加えて溶かす。

２）精製
① 合成ケイ酸マグネシウムカラムクロマトグラフィー
　クロマトグラフ管（内径15 mm）に、カラムクロマトグラフィー用合成ケイ酸マグネシウム５ｇをｎ－ヘキサンに懸濁させて充てんし、無水硫酸ナトリウム約５ｇを積層する。このカラムに１）で得られた溶液を注入した後、アセトン及びｎ－ヘキサン（１：19）混液50 mLを注入し、流出液は捨てる。次いで、アセトン及びｎ－ヘキサン（３：17）混液50 mLを注入し、溶出液を40℃以下で濃縮し、溶媒を除去する。この残留物にアセトン５mLを加えて溶かす。
② グラファイトカーボンカラムクロマトグラフィー
　グラファイトカーボンミニカラム（500 mg）にアセトン10 mLを注入し、流出液は捨てる。このカラムに①で得られた溶液を注入した後、アセトン５mLを注入する。全溶出液を40℃以下で濃縮し、溶媒を除去する。この残留物にエーテル及びｎ－ヘキサン（３：17）混液５mLを加えて溶かす。
③ シリカゲルカラムクロマトグラフィー
　シリカゲルミニカラム（690 mg）にエーテル及びｎ－ヘキサン（３：17）混液10 mLを注入し、流出液は捨てる。このカラムに②で得られた溶液を注入した後、さらに、エーテル及びｎ－ヘキサン（３：17）混液10 mLを注入し、流出液は捨てる。次いで、エーテル及びｎ－ヘキサン（３：７）混液20 mLを注入し、溶出液を40℃以下で濃縮し、溶媒を除去する。この残留物をアセトニトリルに溶解し、種実類、茶及びその他のハーブの場合は正確に１mL、穀類及び豆類の場合は正確に２mL、果実及び野菜の場合は正確に４mLとしたものを試験溶液とする。

５．検量線の作成
　シアゾファミド標準品の0.05～１mg/Lアセトニトリル溶液を数点調製し、それぞれ20μLをHPLCに注入し、ピーク高法又はピーク面積法で検量線を作成する。

６．定量
　試験溶液20μLをHPLCに注入し、５の検量線でシアゾファミドの含量を求める。

７．確認試験
　LC/MSにより確認する。

８．測定条件
１）HPLC
　検出器：UV（波長280 nm）
　カラム：オクタデシルシリル化シリカゲル（粒径５μm）、内径4.6 mm、長さ250 mm
　カラム温度：40℃
　移動相：アセトニトリル及び水（３：２）混液
　保持時間の目安：12分

２）LC/MS
　カラム：オクタデシルシリル化シリカゲル（粒径５μm）、内径２～2.1 mm、長さ150 mm
　カラム温度：40℃
　移動相：0.002 mol/L酢酸アンモニウム溶液及びメタノール混液（７：３）から（１：９）までの濃度勾配を８分間で行い、（１：９）で６分間保持する。
　イオン化モード：ESI
　主なイオン（m/z）：正イオンモード325、負イオンモード216
　注入量：１μL
　保持時間の目安：14分

９．定量限界
　0.01 mg/kg

１０．留意事項
１）試験法の概要
　シアゾファミドを試料からアセトニトリルで抽出し、ｎ－ヘキサンに転溶する。合成ケイ酸マグネシウムカラム、グラファイトカーボンミニカラム及びシリカゲルミニカラムにより精製し、HPLC-UVで測定し、LC/MSで確認する方法である。

２）注意点
① 標準溶液及び試料溶液中のシアゾファミドは、室温で徐々に分解するため、冷蔵で保存する。
② HPLC測定時において試料由来の夾雑成分のピークが、シアゾファミドの溶出位置に認められた場合、HPLCのカラムを変更することにより、シアゾファミドを試料由来の夾雑成分のピークから分離することができる。通常用いているオクタデシルシリル化シリカゲルからトリアコンチルシリル化シリカゲル（C30）あるいはフェニルシリル化シリカゲル（Ph）などの充てん剤を用いたカラムに変更することが有効である。
③ グラファイトカーボンミニカラムクロマトグラフィーは、夾雑物の少ない試料では、省略することもできる。
④ 精製が不十分な場合、アミノプロピルシリル化シリカゲルミニカラム（360 mg）による追加精製が可能である。
　酢酸及びｎ－ヘキサン（0.1：100）混液10 mLで予備洗浄を行う。試料溶液を酢酸及びｎ－ヘキサン混液（0.1：100）10 mLで負荷し、流出液を捨てた後、エーテル、酢酸及びｎ－ヘキサン（10：0.1：90）混液30 mL で溶出させる。
⑤ シアゾファミドはLC/MSでの測定において正イオンm/z：325[M+H]＋または負イオン m/z：216[M-SO2N(CH3)2]－で測定が可能であるが、後者の方が感度も良く、選択性に優れている。
⑥ HPLC分析において、試料由来の妨害成分の影響等で定量が困難な場合はLC/MSを用いて測定を行う。

１１．参考文献
　平成１３年環境省告示第３１号「シアゾファミド試験法」

１２．類型
　Ａ

別添５

オキシテトラサイクリン試験法（農産物）

１．分析対象化合物
　オキシテトラサイクリン

２．装置
　蛍光検出器付き高速液体クロマトグラフ（HPLC-FL）
　液体クロマトグラフ・質量分析計（LC/MS）

３．試薬、試液
　次に示すもの以外は、総則の２に示すものを用いる。
　メタノール　高速液体クロマトグラフ用に製造されたもの。
　イミダゾール　イミダゾール（特級）
　イミダゾール緩衝液　イミダゾール 68.08ｇ、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム　　0.37ｇ及び酢酸マグネシウム 10.72ｇを水に溶かして 800 mLとする。これに酢酸を加えてpＨ7.2に調整し、水を加えて 1,000 mLとする。
　エチレンジアミン四酢酸含有クエン酸緩衝液　第１液：クエン酸 21.0ｇを水に溶かして1,000 mLとする。第２液：リン酸二ナトリウム 71.6ｇを水に溶かして1,000 mLとする。エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム 1.86ｇに第１液 307 mLと第２液 193 mLを混和したものを加えて溶かす。
　塩酸オキシテトラサイクリン標準品　本品 1.000 mgはオキシテトラサイクリン0.850　　　mg力価以上を含む。

４．試験溶液の調製
１）抽出
① 穀類、豆類及び種実類の場合
　試料10.0ｇを量り採り、水20 mLを加え、２時間放置する。これにエチレンジアミン四酢酸含有クエン酸緩衝液50 mLを加え、３分間ホモジナイズした後、毎分3,000回転で10分間遠心分離を行い、水層を採る。残留物にエチレンジアミン四酢酸含有クエン酸緩衝液20 mLを加え、１分間ホモジナイズした後、上記と同様に遠心分離を行い、水層を採り、先の水層に合わせ、吸引ろ過し、ろ液にエチレンジアミン四酢酸含有クエン酸緩衝液を加え、正確に100 mLとする。
② 果実及び野菜の場合
　試料20.0ｇを量り採り、エチレンジアミン四酢酸含有クエン酸緩衝液50 mLを加え、３分間ホモジナイズした後、毎分3,000回転で10分間遠心分離を行い、水層を採る。残留物にエチレンジアミン四酢酸含有クエン酸緩衝液20 mLを加え、１分間ホモジナイズした後、上記と同様に遠心分離を行い、水層を採り、先の水層に合わせ、吸引ろ過し、ろ液にエチレンジアミン四酢酸含有クエン酸緩衝液を加え、正確に100 mLとする。

２）精製
　スチレンジビニルベンゼン共重合体ミニカラム（500 mg）に、メタノール10 mL、水10 mL、飽和エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム溶液５mLを順次注入し、各流出液は捨てる。また、カルボキシメチルシリル化シリカゲルミニカラム（250 mg）に、メタノール10 mL、２％ギ酸溶液10 mL、水20 mL、メタノール５mLを順次注入し、各流出液は捨てる。スチレンジビニルベンゼン共重合体ミニカラムに１）で得られた溶液20 mLを注入した後、流出液は捨てる。さらに、水30 mLを注入し、流出液は捨てる。その後、スチレンジビニルベンゼン共重合体ミニカラムの下にカルボキシメチルシリル化シリカゲルミニカラムを接続し、メタノール５mLを注入し、流出液は捨てる。スチレンジビニルベンゼン共重合体ミニカラムを分離し、カルボキシメチルシリル化シリカゲルミニカラムにギ酸及びメタノール（１：１）混液５mLを注入し、溶出液を窒素気流下で濃縮し溶媒を除去する。この残留物に1.36％リン酸一カリウム溶液を加えて溶かし、1.0 mLとしたものを試験溶液とする。

５．検量線の作成
　オキシテトラサイクリン10.0 mg（力価）に相当する標準品をメタノールに溶解して10 mLとしたものを標準原液とする。これを1.36％リン酸一カリウムで希釈して、0.02～1 mg/L溶液を数点調製し、それぞれ10μLをHPLCに注入し、ピーク高法又はピーク面積法で検量線を作成する。

６．定量
　試験溶液10μLをHPLCに注入し、５の検量線でオキシテトラサイクリンの含量を求める。

７．確認試験
　LC/MSにより確認する。

８．測定条件
１）HPLC
　検出器：FL（励起波長 380 nm、蛍光波長 520 nm）
　カラム：オクタデシルシリル化シリカゲル（粒径５μm） 内径 4.6 mm、長さ150～250 mm
　カラム温度：30℃
　移動相：イミダゾール緩衝液及びメタノール（17：３）混液
　保持時間の目安：５分

２）LC/MS
　カラム：オクタデシルシリル化シリカゲル（粒径３～５μm） 内径 2.0～4.6 mm、長さ150～250 mm
　カラム温度：40℃
　移動相：アセトニトリル、0.1％ギ酸溶液及び水（４：15：１）混液
　イオン化モード：ESI（+）
　主なイオン（m/z）：461、443
　保持時間の目安：2.5分

９．定量限界
　0.01 mg/kg

１０．留意事項
１）試験法の概要
　オキシテトラサイクリンを試料からエチレンジアミン四酢酸含有クエン酸緩衝液で抽出し、スチレンジビニルベンゼン共重合体ミニカラム及びカルボキシメチルシリル化シリカゲルミニカラムにより精製して、HPLC-FLで測定、LC/MSで確認する方法である。

２）注意点
① 遠心分離は、４℃で行う。
② カラム溶出液の濃縮操作はドラフトなどの排気設備内で行う。
③ キウイーなど抽出液の粘性が高い試料については、セライトを５ｇほど添加して抽出操作を行うことで、回収率を向上させることが出来る場合がある。
④ 妨害が見られる時は、カラム温度を40℃にするなど、同じ移動相でもカラム温度を変えることで分離測定ができる。
⑤ ８の２）に示した測定条件では、低濃度時においてトータルイオンクロマトグラム上でピークが確認できない場合があるので、試験溶液をさらに濃縮して測定する等の方法で対応する。

１１．参考文献
１）厚生労働省通知第0124001号「食品に残留する農薬、飼料添加物又は動物用医薬品の成分である物質の試験法について」（オキシテトラサイクリン、クロルテトラサイクリン及びテトラサイクリン試験法）（平成17年1月24日）
２）Yoshida K., Uemori H.,　Chromatography, 26, 67-69 (2005)

１２．類型
　Ｃ

　
ジヒドロストレプトマイシン及びストレプトマイシン試験法（農産物）

１．分析対象化合物
　ジヒドロストレプトマイシン
　ストレプトマイシン

２．装置
　液体クロマトグラフ・質量分析計（LC/MS）

３．試薬、試液
　次に示すもの以外は、総則の２に示すものを用いる。
　クエン酸緩衝液（pＨ３）クエン酸（一水和物）16.6ｇとリン酸二ナトリウム（十二水和物）14.8ｇを量り、水を加えて1,000 mLとする。
　リン酸緩衝液（pＨ７）リン酸一カリウム2.713ｇを量り、水を加えて1,000 mLとし、１mol/L水酸化ナトリウム溶液を加えてpＨ７に調整する。
　硫酸ジヒドロストレプトマイシン標準品　本品1.000 mgはジヒドロストレプトマイシン0.720 mg力価以上を含む。
　硫酸ストレプトマイシン標準品　本品1.000 mgはストレプトマイシン0.718 mg力価以上を含む。

４．試験溶液の調製
１）抽出
　試料20.0ｇを量り採り、１％メタリン酸溶液100 mL及びジクロロメタン50 mLを加え、ホモジナイズした後、毎分3,000回転で遠心分離を行う。水層を採り、ジクロロメタン層及び残留物に１％メタリン酸溶液50 mLを加えてホモジナイズし、上記と同様に遠心分離を行う。よく振り混ぜた後、上記と同様に遠心分離を行う。得られた水層を先の水層に合わせ、これをろ過した後、１％メタリン酸溶液を加えて正確に200 mLとする。

２）精製
① オクタデシルシリル化シリカゲルカラムクロマトグラフィー
　オクタデシルシリル化シリカゲルミニカラム（360 mg）にメタノール及び１％メタリン酸溶液各５mLを順次注入し、各流出液は捨てる。このカラムに１）で得られた抽出溶液の20 mLを注入した後、１％メタリン酸溶液５mLを注入する。全溶出液に１mol/L水酸化ナトリウム溶液を加えてpＨ７に調整する。
② カルボキシジビニルベンゼン－Ｎ－ビニルピロリドン共重合体カラムクロマトグラフィー
　カルボキシジビニルベンゼン－Ｎ－ビニルピロリドン共重合体ミニカラム（150 mg）にｎ－ヘキサン、メタノール及びリン酸緩衝液（pＨ７）各５mLを順次注入し、各流出液は捨てる。このカラムに①で得られた溶液を注入した後、さらにリン酸緩衝液（pＨ７）及びメタノール各10 mLを順次注入し、各流出液は捨てる。次いでクエン酸緩衝液（pＨ３）10 mLを注入する。この溶出液に0.1 mol/Lヘプタンスルホン酸ナトリウム溶液２mLを加える。
③ オクタデシルシリル化シリカゲルカラムクロマトグラフィー
　オクタデシルシリル化シリカゲルミニカラム（360 mg）にメタノール５mLを注入し、流出液は捨てる。次いで0.1 mol/Lヘプタンスルホン酸ナトリウム溶液及び水（１：５）混液６mLを注入し、流出液は捨てる。このカラムに②で得られた溶液を注入した後、水10 mLを注入し、流出液は捨てる。次いでメタノール10 mLを注入し、溶出液を40℃以下で濃縮し、溶媒を除去する。この残留物をアセトニトリル及び0.005 mol/Lヘプタフルオロ酪酸溶液（１：９）混液に溶解し、正確に１mLとしたものを試験溶液とする。

５．検量線の作成
　ジヒドロストレプトマイシン10.0 mg（力価）に相当する硫酸ジヒドロストレプトマイシン標準品及びストレプトマイシン10.0 mg（力価）に相当する硫酸ストレプトマイシン標準品をそれぞれ水に溶解して100 mLとしたものを標準原液とする。これらをアセトニトリル及び0.005 mol/Lヘプタフルオロ酪酸溶液（１：９）混液で希釈し、0.02～0.4 mg/L混合溶液を数点調製し、それぞれ５μLをLC/MSに注入し、ピ－ク高法又はピ－ク面積法で検量線を作成する。

６．定量
　試験溶液５μLをLC/MSに注入し、５の検量線でジヒドロストレプトマイシン及びストレプトマイシンの含量を求め、両者の和を分析値とする。

７．確認試験
　LC/MSにより確認する。

８．測定条件
　LC/MS
　カラム：オクタデシルシリル化シリカゲル（粒径５μm）、内径２mm、長さ100 mm、
　カラム温度：40℃
　移動相：アセトニトリル及び0.005 mol/Lヘプタフルオロ酪酸溶液（１：９）混液
　イオン化モード：ESI（+）
　主なイオン（m/z）：ジヒドロストレプトマイシン　584、263
　ストレプトマイシン　582、263
　保持時間の目安：ジヒドロストレプトマイシン　18分
　ストレプトマイシン　17分

９．定量限界
　各0.01 mg/kg

１０．留意事項
１）試験法の概要
　ジヒドロストレプトマイシン及びストレプトマイシンを試料からメタリン酸で抽出すると同時にジクロロメタンで洗浄する。オクタデシルシリル化シリカゲルミニカラム、カルボキシジビニルベンゼン－Ｎ－ビニルピロリドン共重合体ミニカラム及びオクタデシルシリル化シリカゲルミニカラムにより精製した後、LC/MSで測定及び確認する方法である。

２）注意点
① カルボキシジビニルベンゼン－Ｎ－ビニルピロリドン共重合体カラムクロマトグラフィーでは試料溶液注入前に、ｎ－ヘキサン、メタノール及びリン酸緩衝液（pＨ７）各５mLをあらかじめ流下させ洗浄したものを使用するが、ｎ－ヘキサンを流下させた後に十分吸引を行い、ｎ－ヘキサンを除去した後にメタノールを流下させる。
② LC/MSにおいてフラグメントイオンであるm/z＝263で測定する場合、機種によっては親イオン（m/z＝582、584）に比べ低感度になることがある。その場合はフラグメンテーションを促進させるパラメータを変更する、注入量を増やす等の対応を行う。

１１．参考文献
　厚生労働省通知第0124001号「食品に残留する農薬、飼料添加物又は動物用医薬品の成分である物質の試験法について」（ジヒドロストレプトマイシン、ストレプトマイシン、スペクチノマイシン及びネオマイシン試験法）（平成17年１月24日）

１２．類型
　C

　
　
メトコナゾール試験法（農産物）

１．分析対象化合物
　メトコナゾール（シス体及びトランス体）

２．装置
　アルカリ熱イオン化検出器付きガスクロマトグラフ（GC-FTD）又は高感度窒素・リン検出器付きガスクロマトグラフ（GC-NPD）
ガスクロマトグラフ・質量分析計（GC/MS）

３．試薬、試液
　次に示すもの以外は、総則の２に示すものを用いる。
　メトコナゾール（シス体）標準品　本品はメトコナゾール（シス体）98％以上を含み、融点は 110～113℃である。
　メトコナゾール（トランス体）標準品　本品はメトコナゾール（トランス体）98％以上を含み、融点は110～113℃である。

４．試験溶液の調製
１）抽出
① 穀類の場合
　試料10.0ｇを量り採り、水20 mLを加え、２時間放置する。
　これにアセトン100 mL を加え、ホモジナイズした後、吸引ろ過する。ろ紙上の残留物に、アセトン50 mL を加えてホモジナイズし、上記と同様にろ過する。得られたろ液を合わせて40℃以下で約30 mLまで濃縮する。これに10％塩化ナトリウム溶液100 mLを加え、酢酸エチル及びｎ－ヘキサン（１：１）混液100 mL及び50 mLで２回振とう抽出する。抽出液に無水硫酸ナトリウムを加えて脱水し、無水硫酸ナトリウムをろ別した後、40℃以下で濃縮し、溶媒を除去する。
　この残留物にｎ－ヘキサン50 mLを加え、ｎ－ヘキサン飽和アセトニトリル50 mLずつで３回振とう抽出する。抽出液を合わせ、40℃以下で濃縮し、溶媒を除去する。この残留物にアセトン５ mLを加えて溶かす。
② 果実の場合
　果実（みかんの果皮を除く）の場合は、試料20.0ｇを量り採る。みかんの果皮の場合は、試料10.0ｇを量り採る。
　これにアセトン100 mLを加え、ホモジナイズした後、吸引ろ過する。ろ紙上の残留物に、アセトン50 mLを加えてホモジナイズし、上記と同様にろ過する。得られたろ液を合わせて 40℃以下で約30 mLまで濃縮する。これに10％塩化ナトリウム溶液100 mLを加え、酢酸エチル及びｎ－ヘキサン（１：１）混液100 mL及び50 mLで２回振とう抽出する。抽出液に無水硫酸ナトリウムを加えて脱水し、無水硫酸ナトリウムをろ別した後、40℃以下で濃縮し、溶媒を除去する。この残留物にアセトン５mLを加えて溶かす。

２）精製
① グラファイトカーボンカラムクロマトグラフィー
　グラファイトカーボンミニカラム（500 mg）にアセトン10 mLを注入し、流出液は捨てる。このカラムに、１）で得られた溶液を注入した後、さらにアセトン15 mLを注入する。全溶出液を40℃以下で濃縮し、溶媒を除去する。この残留物に酢酸エチル及びｎ－ヘキサン（１：９）混液５mLを加えて溶かす。
② アミノプロピルシリル化シリカゲルカラムクロマトグラフィー
　アミノプロピルシリル化シリカゲルミニカラム（360 mg）に酢酸エチル及びｎ－ヘキサン（１：９）混液10 mLを注入し、流出液は捨てる。このカラムに ①で得られた溶液を注入し、流出液は捨てる。さらに、酢酸エチル及びｎ－ヘキサン（１：９）混液10 mLを注入し、流出液は捨てる。次いで、酢酸エチル及びｎ－ヘキサン（１：１）混液15 mLを注入し、溶出液を40℃以下で濃縮し、溶媒を除去する。この残留物をアセトンに溶解し、正確に２mL（穀類の場合は１mL、みかんの果皮の場合は10 mL）としたものを試験溶液とする。

５．検量線の作成
　メトコナゾール（シス体）標準品及びメトコナゾール（トランス体）標準品の各0.05～1.0 mg/Lアセトンの混合標準溶液を数点調製し、それぞれ２μLをGCに注入し、ピーク高法又はピーク面積法で検量線を作成する。

６．定量
　試験溶液２μLをGCに注入し、５の検量線でメトコナゾール（シス体）及びメトコナゾール（トランス体）の含量を求め、メトコナゾール（シス体）及びメトコナゾール（トランス体）の和としてメトコナゾールの含量を求める。

７．確認試験
　GC/MSにより確認する。

８．測定条件
１）GC
　検出器：FTD又はNPD
　カラム：メチルシリコン、内径 0.53 mm、長さ 30ｍ、膜厚 １μm
　カラム温度：150℃（１分）－10℃／分－280℃（１分）
　注入口温度：280℃
　検出器温度：320℃
　キャリヤーガス：ヘリウム
　保持時間の目安：メトコナゾール（シス体）11.4分、メトコナゾール（トランス体）11.7分

２）GC/MS
　カラム：５％フェニル－メチルシリコン　内径 0.25 mm、長さ 30ｍ、膜厚 0.25μm
　カラム温度：150℃（１分）－10℃/分－300℃（１分）
　注入口温度：250℃
　キャリヤーガス：ヘリウム
　イオン化モード（電圧）：EI（70eV）
　主なイオン（m/z）：319、250、125（シス体及びトランス体とも共通）
　注入量：１μL
　保持時間の目安：メトコナゾール（シス体）13.5分、メトコナゾール（トランス体）13.8分

９．定量限界
　メトコナゾール（シス体）及びメトコナゾール（トランス体）の総和として0.01 mg/kg（みかんの果皮の場合は、0.1 mg/kg）

１０．留意事項
１）試験法の概要
　メトコナゾール（シス体）及びメトコナゾール（トランス体）を試料からアセトンで抽出し、酢酸エチル及びｎ－ヘキサン混液に転溶する。果実はそのまま、穀類はアセトニトリル／ヘキサン分配で脱脂した後、グラファイトカーボンミニカラム及びアミノプロピルシリル化シリカゲルミニカラムで精製した後、GC（FTD又はNPD）で測定し、GC/MSで確認する方法である。

２）注意点
① 液々分配においてエマルジョン等により分配が不良となる場合は、多孔性ケイソウ土カラム (試料20 mL用)を利用する方法に変更するとよい。操作概要： 試料抽出液を約20 mLまで濃縮し、カラムに負荷した後、ｎ－ヘキサン120 mLで溶出する。
② 精製が不十分な場合は、フロリジルミニカラム（910 mg）による精製を追加するとよい。操作概要： 残留物をアセトン及びｎ－ヘキサン（１：９）混液５mLに溶解し、カラムに負荷した後、アセトン及びｎ－ヘキサン（１：９）混液10 mLで洗浄、アセトン及びｎ－ヘキサン（３：７）混液15 mLで溶出する。

１１．参考文献
　なし

１２．類型
　Ｃ